1.原理:將脂肪酸甘油酯轉(zhuǎn)化為脂肪酸甲酯后,進行氣相色譜測定。用歸一法確定各脂肪酸的組成比例。
1.脂肪酸甲酯的制備
2.1 試劑:石油迷—乙迷溶液:1:1(V/V)
氫氧化鉀-甲醇溶液0.4(mol/L):稱取2.3克氫氧化鉀溶于100毫升無水甲醇中,儲入具塞瓶中備用,使用期不得超過2周
甲醇鈉溶液:含1%鈉的無水乙醇溶液。從試劑罐的溶劑中取出約1克鈉,用濾紙除去上面附著的溶劑,溶于100毫升無水甲醇中,等氣泡放完并冷卻后,儲入棕色瓶中備用,瓶塞上裝有硅膠干燥管。
鹽酸-甲醇溶液:0.4(mol/L)
2.2 制備方法:
(a ) FFA≤10%
稱取100—250毫克油樣,至1毫克,裝入25毫升具塞容量瓶中,加入石油迷—乙迷溶液約2毫升,稍事振搖,待油樣溶解后,再加入氫氧化鉀-甲醇溶液約1毫升,混勻,在室溫下放置約30分鐘,再沿瓶塞加入水,靜置,待分層。(上層以甲酯,溶劑為主,下層以脂肪醇,水為主)吸取上清液0.5—2微升進樣。
(b) FFA≥10%
稱取100—250毫克油樣,至1毫克,防入酯化瓶中加入5毫升甲醇鈉溶液及沸石數(shù)里粒,接上冷凝管加熱回流約15分鐘,直至油珠消失,再由冷凝管加入約6毫升鹽酸-甲醇溶液繼續(xù)加熱回流約10分鐘,停止加熱,冷卻后,取下冷凝管,將酯化瓶中的溶液倒入分液漏斗中,加入10毫升水和10毫升正庚烷,猛烈振搖2分鐘,分層后,棄去水相,將上層正庚烷過濾,(通過鋪有無水硫酸鈉的脫脂棉)吸取0.5—2微升正庚烷溶液進行測定
2.分析方法
GC-2010氣相色譜儀 FID檢測器,毛細管進樣 色譜條件:FFAP柱0.3mm*30M IN=DE=230—240度 OV—220度 靈敏度1000, 衰減 1, 載氣0.1Mpa.