Q:檢測(cè)時(shí)空白對(duì)照的吸光度變<0.3,儀器無法正常檢測(cè),應(yīng)如何處理?A:出現(xiàn)空白對(duì)照的吸光度變<0.3的原因主要有以下兩點(diǎn):一是試劑保存條件不當(dāng),以致酶試劑活性下降,正確的保存條件為4-8℃冷藏保存(試劑為干粉狀態(tài)時(shí)建議零下冷凍保存);二是檢測(cè)環(huán)境的溫度過低,農(nóng)藥殘留檢測(cè)的最適溫度為38℃,若檢測(cè)環(huán)境的溫度低于15℃時(shí),酶活性受到抑制,建議用戶進(jìn)行必要的保溫措施(水浴、恒溫箱等),以確保實(shí)驗(yàn)試劑的溫度不會(huì)過低。
3.索氏提取法:大多數(shù)農(nóng)藥是脂溶性的,所以一般采取提取脂肪的方法,將經(jīng)分散而干燥的樣品用無水或石油醚等溶劑提取使樣品中的脂肪和農(nóng)殘進(jìn)入溶劑中,再凈濃縮即可分析。適用谷物及其制品、干果、脫水蔬菜、茶葉、干飼料等樣品。無水或石油醚等溶劑,提取效率高,操作簡(jiǎn)便。需要注意:提取時(shí)間長,消耗大量的溶劑必須考慮被測(cè)物的穩(wěn)定性;含水量過高的水果蔬菜不宜作為分析對(duì)象。4.液-液萃取法:向液體混合物中加入某種適當(dāng)溶劑,利用組分溶解度的差異使溶質(zhì)由原溶液轉(zhuǎn)移到萃取劑的過程。向溶液試樣加入非極性或水溶性的溶劑,用振蕩等方法來輔助提取試樣中的溶質(zhì)。適合液態(tài)樣品,或經(jīng)過其他方法溶劑提取后的液態(tài)基質(zhì)。常用非極性的溶劑有正己烷、、乙乙酯;常用的水溶性溶劑有二烷、醇、乙、以及水。
在一定條件下,有機(jī)磷和氨基類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下,酶催神經(jīng)傳導(dǎo)謝產(chǎn)物(乙酰膽堿)水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用分光光度計(jì)測(cè)定412nm下吸光度隨時(shí)間的變值,計(jì)算出抑制率,通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機(jī)磷或氨基酯類農(nóng)藥的殘留。