黃曲霉毒素B1檢測(cè)卡
使用說(shuō)明書(shū)
1 原理及用途
本產(chǎn)品應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)抑制膠體金免疫層析的原理制成，用于檢測(cè)谷物、飼料等樣本中的黃曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）。
樣本溶液滴入檢測(cè)卡的加樣孔后，樣本溶液中的黃曲霉毒素B1與金標(biāo)抗體相結(jié)合，從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上黃曲霉毒素B1偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本溶液中的黃曲霉毒素B1含量大于檢測(cè)限時(shí)檢測(cè)線(xiàn)不顯色，結(jié)果為陽(yáng)性；當(dāng)樣本溶液中黃曲霉毒素B1含量小于檢測(cè)限時(shí)檢測(cè)線(xiàn)顯紫紅色，結(jié)果為陰性。
2 技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑卡靈敏度：1ppb（ng/ml）
對(duì)樣本的最終檢測(cè)限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。
2.2 樣本檢測(cè)下限：
谷物、飼料、糧油……………10ppb
3 試劑盒組成
檢測(cè)卡…………………………40個(gè)/盒
說(shuō)明書(shū)…………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器：均質(zhì)器 、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）
4.2 微量移液器：?jiǎn)蔚?0μl-200μl，100μl-1000μl
4.3 試劑：甲醇，正己烷，乙酸乙酯
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知：
實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5.2 配液：
配液1：樣本提取液
70%甲醇，即V甲醇:V去離子水=7:3。
5.3 樣本前處理步驟：
5.3.1 谷物、飼料
1）稱(chēng)取1g粉碎樣本于離心管中，再根據(jù)不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液
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檢測(cè)下限 |
10ppb |
20ppb |
30ppb |
50ppb |
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樣本提取液 |
2ml |
4ml |
6ml |
10ml |
振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘。
2）取0.1ml上清，加入0.4ml去離子水，混勻；
3）取80ul進(jìn)行分析。
5.3.2谷物、飼料氮吹法
如果飼料樣本吸水性太大，為保證一定的靈敏度，可采用氮吹法提取樣本：
稱(chēng)取1g粉碎樣本于離心管中，加入5ml乙酸乙酯，震蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘，取1ml上清液于1.5ml離心管中，用氮?dú)獯蹈桑俑鶕?jù)不同檢出限要求加入一定量的樣本復(fù)溶液混勻溶解，直接取80ul進(jìn)行分析。
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檢測(cè)下限 |
2.5ppb |
5ppb |
10ppb |
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樣本復(fù)溶液 |
0.5ml |
1ml |
2ml |
5.3.3 糧油（菜油、麻油、色拉油、花生油等）
1）稱(chēng)取2g樣本于離心管中，再根據(jù)不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液
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檢測(cè)下限 |
5ppb |
10ppb |
20ppb |
50ppb |
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樣本提取液 |
2ml |
4ml |
8ml |
20ml |
然后加入8ml正己烷，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘。
2）去除上層液體，取0.1ml下層液體加入0.4ml去離子水，混勻；
3）取混勻的液體80ul進(jìn)行分析。
6 實(shí)驗(yàn)步驟
6.1 撕開(kāi)檢測(cè)卡鋁箔包裝袋，取出檢測(cè)卡，放于平整、潔凈的臺(tái)面上。
6.2 用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的樣本液體，緩慢、逐滴的（應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生）滴加2-3滴（約60ul）到加樣孔（S）內(nèi)。
6.3 室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果。
7 結(jié)果判斷
陰性：在檢測(cè)窗內(nèi)，檢測(cè)線(xiàn)（T）及對(duì)照線(xiàn)（C）同時(shí)出現(xiàn)紫紅色線(xiàn)。
陽(yáng)性：在檢測(cè)窗內(nèi)，只有對(duì)照線(xiàn)（C）出現(xiàn)一條紫紅色線(xiàn)。
失效：在檢測(cè)窗內(nèi)，對(duì)照線(xiàn)（C）不出現(xiàn)紫紅色線(xiàn)。
陰性 陽(yáng)性 無(wú)效 無(wú)效
8 注意事項(xiàng)
8.1 過(guò)期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品，均不可使用。
8.2 檢測(cè)卡從冰箱中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開(kāi)，打開(kāi)的檢測(cè)卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
8.3 不要觸摸檢測(cè)卡中央的白色膜面。
8.4 取液滴管不可混用，以免交叉污染。
8.5 待檢樣本溶液需清亮、無(wú)混濁顆粒、無(wú)細(xì)菌污染，否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異?，F(xiàn)象，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定。
儲(chǔ)藏條件：試劑盒于4-30℃干燥環(huán)境下保存。
保 質(zhì) 期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝盒。
【生產(chǎn)企業(yè)】
企業(yè)名稱(chēng)：杭州華心生物科技有限公司
地 址：杭州市西湖區(qū)三墩鎮(zhèn)西園路10號(hào)
尚坤創(chuàng)意園 A416
電 話(huà)：0571-88732675
傳 真：0571-88733175
郵 編：310001
